miRNA调控靶基因的生物信息学预测（技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务）

服务流程：

使用至少三种以上的在线工具进行miRNAs靶基因的预测，并优选考虑在物种间具有高度保守特性的序列，结合蓝吉生物技术部特有的相关细胞功能基因数据库、致病基因数据库与miRNAs功能数据库提供的参考信息，作出最为接近真实的判断。

靶基因鉴定：luciferase报告基因表达载体的构建与检测（技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务）

简介

当miRNAs与靶基因的3’UTR结合后，主要抑制mRNA的翻译，可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平；也有部分表现为对标靶mRNA的降解，可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法，都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测，蓝吉生物的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒，对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。

服务优势：

★采用Promega公司特有psiCHECK质粒；

★所采用的Luciferase双萤光报告系统，可以获得宽泛的线性定量范围与极高的灵敏度；

★采用瞬时转染技术，操作简便、快速，周期短，适用于绝大多数细胞类型。

服务流程：

★ PCR扩增靶基因的3’UTR，或直接合成结合位点序列（1-3次重复）；

★ 将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒；

★ 合成miRNA 模拟物；

★ 将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞；

★ 多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。

2.3  miRNA反义锁核酸的瞬时转染（技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务）

服务流程：

★ miRNAs的LNA合成；

★ 确定转染方案，并进行转染条件优化；

★ 转染条件确定后进行正式实验；

★ 按客户检测要求收集细胞样品进行下一轮功能检测实验；

★ 向客户提交数据分析结果与实验报告。

服务流程：

★PCR扩增靶基因的3’UTR，或直接合成结合位点序列（1-3次重复）；

★将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒；

★合成miRNA模拟物；

★将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞；

★多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。

miRNA反义锁核酸的瞬时转染（技术服务-分子生物学-分子生物学整体服务）

服务流程：

★miRNAs的LNA合成；

★确定转染方案，并进行转染条件优化；

★转染条件确定后进行正式实验；

★按客户检测要求收集细胞样品进行下一轮功能检测实验；

★向客户提交数据分析结果与实验报告。